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BRAF [A246P&V600G] BaF3

CBP73419

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I. Background

      BRAF 基因是位于人類 7 號染色體長臂(7q34)的原癌基因,編碼絲氨酸/蘇氨酸蛋白 激酶,屬于 RAF 激酶家族,參與 MAPK 信號通路調控細胞增殖、分化及存活。其最常見 的突變類型為 V600E 突變(約占 80%以上),該突變導致蛋白持續(xù)激活,引發(fā)細胞異常增 殖,與黑色素瘤(約 30-60%)、甲狀腺乳頭狀癌(約 40-45%)、結直腸癌(約 10-15%) 等多種惡性腫瘤密切相關。 BRAF 突變分為三類:I 類(如 V600E,單體激活)、II 類(二聚體激活)和 III 類 (失活突變),其中 I 類對 BRAF 抑制劑(如達拉非尼、維莫非尼)敏感,雙靶治療(達 拉非尼+曲美替尼)可顯著延長患者生存期。BRAF 基因檢測在腫瘤診斷、靶向治療選擇、 預后評估及耐藥監(jiān)測中具有重要臨床價值,是精準醫(yī)療的關鍵靶點之一。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 細胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅動基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。

Figure 1. BRAF[A246P&V600G] BaF3 細胞的構建原理圖
 
III. Introduction
Cell Line Name: BRAF [A246P&V600G] BaF3
Host Cell: BaF3
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+2 μg/ml Puromycin
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1.WB of BRAF [A246P&V600G] BaF3


Figure 2. WB of BRAF [A246P&V600G] BaF3
 

2.Sanger of BRAF [A246P&V600G] BaF3

Figure 3. Sanger of BRAF [A246P&V600G] BaF3

3. Anti-proliferation assay


Figure 4. CTG Proliferation Assay of BRAF [A246P&V600G] BaF3(C4).

 

 

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