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GRE-Luc A549

CBPM0011

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I. Background
      糖皮質激素(GC) 是類固醇激素,它們在炎癥、生長、代謝和發(fā)育中的多種作用, 對許多生理功能具有重要影響。由于其抗增殖和抗炎特性,GCs 幾十年來一直被用于治療 惡性腫瘤以及各種炎癥和自身免疫性疾病。臨床上常用的合成 GC 包括地塞米松(Dex)、 倍他米松、可的松、氫化可的松、甲潑尼龍和潑尼松龍。

      由腎上腺皮質產生的內源性 GC 受到 HPA(下丘腦-垂體-腎上腺)軸的嚴格調控,它 們的親脂性使它們能夠輕松地通過細胞膜擴散。在細胞內,GCs 通過糖皮質激素受體(GR) 介導其作用,糖皮質激素受體是屬于核激素受體超家族的轉錄因子。在不存在 GC 的情況 下,GR 與分子伴侶蛋白形成復合物被隔離在細胞質中;當它存在于細胞質中時,分子伴 侶蛋白保持其非活性狀態(tài)并組織受體的結構構象以接受配體。配體結合后,GR 變得活躍 并在細胞質和細胞核之間動態(tài)穿梭,作為轉錄因子發(fā)揮作用,正向和負向調節(jié)許多依賴于 GR 的基因。

      GR 的轉錄誘導主要由 GR 同源二聚體與包含糖皮質激素反應元件(GREs) 的啟動子 區(qū)域結合觸發(fā),這種機制稱為 GR 依賴性反式激活(TA)。另一方面,GR 依賴的反式抑 制(TR)是由 GR 與 DNA 結合的轉錄因子如 NF-κB 和激活蛋白-1 (AP-1)相互作用介導 的,導致各自的抑制炎癥信號級聯(lián)。一些患有糖皮質激素抵抗型哮喘、類風濕性關節(jié)炎、 潰瘍性結腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、急性淋巴細胞白血病或慢性淋巴細胞白血病的患者的 GR 水平升高。
 
II. Description
     GRE-Luc A549 報告基因細胞,是由 GRE 調控并表達 Luc 熒光素酶報告 基 因的 A549 細 胞。 Dexamethasone (Hexadecadrol, 地 塞米 松)是 糖皮質激素受體 (Glucocorticoid Receptor)激動劑、凋亡誘導劑,原理見下圖所示。



Figure 1. GRE-Luc A549 細胞原理示意圖
 
III. Introduction
Host Cell: A549
Expressed gene: GR-GAL4 Luciferase 
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS+300 μg/ml hygromycin
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Lung
Disease: Carcinoma
Morphology: Epithelial cells, growing adherently as monolayer
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Dose Response of Dexamethasone in GRE-Luc A549(C34).

 

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